Il reagente EA 31 Pap 3A è una soluzione alcolica di due coloranti acidi, Eosina Y e Verde chiaro SF, con aggiunta di acido fosfotungstico (PTA). Il primo passaggio nell'utilizzo del metodo di colorazione Papanicolaou implica la colorazione nucleare con una soluzione di ematossilina e i due passaggi successivi consistono nella colorazione di contrasto utilizzando il reagente OG-6 monocromatico e una delle formulazioni del reagente EA policromatico.
La molecola Orange G colora il citoplasma e nelle fasi successive della procedura rimane solo nelle cellule mature e cheratinizzate. Il terzo passaggio consiste nell'utilizzo di una delle soluzioni policromatiche di EA che colora i componenti cellulari non colorati, come cellule squamose, nucleoli, ciglia ed eritrociti.
I campioni del test possono essere ginecologici e non ginecologici, come espettorato, urina e campioni di puntura citologica. Per ottenere risultati di colorazione ottimali, il reagente EA 31 Pap 3A ha proprietà completamente conformi ad altri reagenti per lo striscio citologico acc. a Papanicolaou – Ematossilina HP, reagente Pap 1A e OG-6, reagente Pap 2A.
