Il reagente EA 65 Pap 3D è una soluzione alcolica di due coloranti acidi, Eosina Y e Verde chiaro SF, con aggiunta di acido fosfotungstico (PTA). Il primo passaggio nell'utilizzo del metodo di colorazione Papanicolaou implica la colorazione nucleare con una soluzione di ematossilina e i due passaggi successivi consistono nella colorazione di contrasto utilizzando i reagenti monocromatici OG-6 o Orange II e una delle formulazioni di reagenti policromatici EA.
Le molecole Orange G e Orange II colorano il citoplasma e nelle fasi successive della procedura rimane solo nelle cellule mature e cheratinizzate. Nella terza fase viene utilizzata una delle soluzioni policromatiche di EA. Tali soluzioni differenziano tra cellule squamose. I campioni del test possono essere ginecologici e non ginecologici, come espettorato, urina, diarrea e campioni di puntura citologica.
Per ottenere risultati di colorazione ottimali, il reagente EA 65, Pap 3D ha proprietà completamente conformi ad altri reagenti per lo striscio citologico acc. a Papanicolaou – Reagente HP ematossilina, Pap 1A o 1B, reagente OG-6, Pap 2A e reagente Orange G II, Pap 2B
